AF647 NHS 酯 (Alexa Fluor 647 NHS Ester) 试剂参数总结
发布时间:
2023-07-12
来源:
http://www.xinyanbm.com/
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一、产品介绍:
AF647 NHS酯(琥珀酰亚胺酯)与Alexa Fluor 647NHS酯相同。它是一种明亮的远红色荧光染料。AF647的NHS酯(或琥珀酰亚胺基酯)是方便的胺反应形式,用于将该染料与蛋白质或抗体结合。
AF647染料是水溶性的并且pH从pH4到pH10不敏感,用于抗体、肽、蛋白质、修饰寡核苷酸和其他含胺分子的细胞可视化和标记。
AF 647 NHS酯染料具有高的水溶性和高的荧光量子产率,它在宽的摩尔范围内对pH不敏感。广泛应用于成像和流式细胞术。
Alexa Fluor 647染料分子可以以高摩尔比附着在蛋白质上,而不会产生显著的自猝灭,从而产生更明亮的偶联物和更灵敏的检测。
二、产品参数:
1.产品基本信息
产品名称:AF647 NHS ,Alexa Fluor 647NHS
分子量:1259.66
储存条件:保存在冰箱-15℃干燥
保质期:12个月
存储条件:在零下15度以下保存, 避免光照
2.产品物理化学光谱特性:
激发波长(nm):651
发射波长(nm):672
荧光基团标记:Alexa Fluor™ 647 染料
反应性基团:NHS 酯
反应性:蛋白和配体、胺修饰的寡核苷酸上的伯胺
偶联物的 Ex/Em:651/672 nm
消光系数:270,000 cm-1M-1
光谱类似染料:Cy5™
3.AF 647活性酯结构式:

AF 647的吸收和发射光谱:

三、Alexa Fluor™ NHS 酯可参与相关实验抗体标记
1.典型偶联反应
您可以将胺反应性试剂与几乎任何蛋白或肽偶联(提供的方案针对 IgG 抗体进行了优化)。您可以针对任何量的蛋白按比例缩放反应,但为了获得不错的结果,蛋白的浓度应至少为 2 mg/mL。我们建议使用三种不同的反应性试剂/蛋白摩尔比进行三种不同程度的标记。
Alexa Fluor™ NHS 酯通常溶于高质量的无水二甲基甲酰胺 (DMF) 或二甲亚砜 (DMSO) (D12345) 中,并在 0.1–0.2 M 碳酸氢钠缓冲液(pH 值 8.3)中于室温下进行反应,持续 1 小时。由于末端胺的 pKa 低于赖氨酸 ε-氨基基团的 pKa,您可以使用接近中性 pH 值的缓冲液对胺末端进行更具选择性的标记。
2.偶联物纯化
通常使用凝胶过滤柱(如 Sephadex™ G-25、BioGel™ P-30 或等效柱)将标记抗体与游离 Alexa Fluor™ 染料分离。对于更大或更小的蛋白,选择具有适当分子量滤除点的凝胶过滤介质或通过透析纯化。
四、相关AF647类型试剂产品:
AF568 carboxylic acid
AF555 NHS Ester,Alexa Fluor555 SE
AF568 alkyne, 5-isomer
AF488 TCO,AlexaFluor488 TCO
AF488 azide,Alexa Fluor488 N3
AF488-dUTP,Alexa Fluor488 dUTP
AF488 Concanavalin A
AF594 amine,AlexaFluor594 NH2
AF532 acid,AlexaFluor 532 COOH
AF 647 azide,Alexa Fluor 647 N3
AF 647 amine,Alexa Fluor 647 NH2
AF750 NHS Ester,Alexa Fluor750 SE
AF430 amine,Alexa Fluor430 NH2
AF430 carboxylic acid,Alexa Fluor430 COOH
AF514 NHS ester,Alexa Fluor514 SE
AF514 carboxylic acid,AF514 COOH
AF430 tetrazine,Alexa Fluor430 tetrazine
AF488 carboxylic acid,Alexa Fluor488 COOH
(备注:陕西新研博美有限公司供应的试剂仅供科研使用,非食用,非医用)
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