TPEN金属离子螯合剂，Zinpyr-1, Cell Permeant 锌离子荧光探针 TSQ的相关特性及应用示例

锌（Zinc,Zn）是体内第二丰富的过渡金属，是非常必要的催化、结构和调控离子。锌离子（Zn²⁺）参与稳态、免疫反应、氧化应激、凋亡和衰老等生理过程。锌被指出能用作突触前神经元的一种保守型神经递质，以及用作一种跨膜信号贯穿突触前神经元。异常的锌代谢与许多神经性疾病有关联，包括阿尔茨海默病，帕金森病和癫痫（epilepsy）。荧光成像被证明是很好的体内锌离子监测技术。

产品描述
Zinpyr-1（ZP-1）是一种具细胞膜渗透性的荧光探针，选择性检测锌离子（Zn2+）（Kd= 0.7 ± 0.1 nM）。一旦与金属离子复合，诱发荧光信号产生。活细胞内，Zinpyr-1主要对高尔基或高尔基关联的囊泡染色。随着锌离子浓度增高，Zinpyr-1的激发波长从515nm迁移到507nm，发射波长范围在513-558nm。还能用作PET传感器。

产品特性
CAS NO：288574-78-7
化学名：4',5'-bis[[bis(2-pyridinylmethyl)amino]methyl]-2',7'-dichloro-3',6'-dihydroxy-spiro[isobenzofuran -1(3H),9'-[9H]xanthe
n]-3-one
同义名：ZP-1; 4′,5′-Bis[bis(2-pyridylmethyl)aminomethyl]-2′,7′-dichlorofluorescein;
分子式：C46H36Cl2N6O5
分子量：823.72
Ex/Em：515-507nm/513-558nm
纯度：≥95%
外观：固体
溶解性：溶于DMSO
化学结构式：

Zinpyr-1, Cell Permeant 锌离子荧光探针，288574-78-7结构式

保存与运输方法
保存：-20ºC避光干燥保存，2年有效。
运输：冰袋运输。

注意事项
1）由于产品量少，收到本品后需直接在瓶内溶解配制母液。
2）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

1）

实验目的：研究巨噬细胞吞噬引起Zn2+介导的真菌致病菌格拉布勒他念珠菌（C. glabrata）清除能力。用Zn2+特异性探针- Zinpyr-1和碘化丙啶（PI）双重检测Zn2+水平和细胞活力的变化。
使用方法：Zinpyr-1溶于DMSO配制成10mM储存液，按照10μl/管分装置于-20℃避光冻存，避免反复冻融。于实验前，将储存液用PBS稀释到10μM工作液。工作液现配现用。将含探针的染色工作液加入巨噬细胞（感染念珠菌）于37℃孵育30min。流式细胞仪分析染色结果，Zinpyr-1的激发和发射波长约为488nm和525nm。

Fig. Visualization of viable Candida glabrata inside phagolysosomes
(A) Gating strategy for analysis of C. glabrata by flow cytometry. The PI-Zinpyr panel compares untreated (black) with heat-stressed(red) C. glabrata.
(B) Percentage of dead C. glabrata, comparing untreated and heat-stressed fungal cells before interaction with BMDMs.
(C) Live and dead C. glabrata populations are analyzed for their zinc-dependent signal intensity (MdFI) equaling the intracellular amount of labile zinc in fungal cells. MdFI, median fluorescence intensity.

2）

实验目的：使用锌离子荧光探针- Zinpyr-1来检测拟南芥根部Zn2+的分布。
使用方法：Zinpyr-1溶于DMSO配制成1mM储存液，置于-20℃避光冻存，避免反复冻融。之后用0.9%生理盐水稀释到工作浓度。7-8天的幼苗用含10mM EDTA的去离子水清洗3遍，之后浸入含5-20μM Zinpyr-1的工作液内，于室温避光孵育3h。之后用去离子水清洗，再浸入含75μM PI的溶液降细胞壁染红，再清洗。样本用0.9%生理盐水封片后，用共聚焦显微镜观察，用488nm激发器激发，分别用FITC和Texas red 滤片来观察。

Fig. Confocal laser-scanning microscope (CLSM) images of Arabidopsis roots of (a,b) wild-type, (c,d) hma2, hma4 and (e,f) hma4 seedlings exposed to 20 µm Zinpyr-1 for 3 h. The boxed regions in (a,c,e) illustrate the regions used to quantify average fluorescenceintensity. x, xylem; p, pericycle; e, endodermis; c, cortex; ep, epidermis. Bars, 50 µm.

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