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Enhanced NaTrium Green-2 AM钠离子指示探针;ENG-2 AM
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英文名称:ENG-2 AM
所属分类:
- 产品描述
- 参数
- 价格
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- 商品名称: Enhanced NaTrium Green-2 AM钠离子指示探针;ENG-2 AM
- CAS号: N/A
- 产品货号: Y-TZ-0013
中文名称:Enhanced NaTrium Green-2 AM钠离子指示探针<br>英文名称:ENG-2 AM
产品描述
Enhanced NaTrium Green-2 AM (ENG-2 AM)是Asante NaTrium Green-2 AM(ANG-2AM)的替代物,是一种县细胞膜渗透性的新型钠离子(Na+)荧光探针。一旦讲入细胞后,经非特异性酯酶水解生成水溶性形式的探针,不同于传统Na+探针SBFL,ENG-2是一种可见光光谱范用的探针,激发波长范围是488-525nn,发射波长是545nm。
ENG-2 AM具有容易加载、缓慢泄露、良好光稳定性和宽动力学范围等理想特征,也正好弥补传统Na+荧光探针SBFIAM的缺陷。产品特性
最大激发波长:525±3nm
最大发射波长:545±3nm
溶解性:DMSO
保存与运输方法
保存:-20°C避光干燥保存,至少1年有效。
运输:冰袋运输。常用操作流程(AM荧光探针)(仅做参考)
1.1 使用无水DMSO溶解ENG-2AM(Mw:1084g/mol)配制成1-5mM储存液,比如往504ug ENG-2AM冻干粉内加入23ul DMSO,充分溶解后配制成2mM储存液。-20”C分装干燥冻存,避免反冻融。
1.2 通常在合适当浓度AM探针的无血清培养基中实现探针加载,建议正式实验前向加载培养基内加入Pluronic F-127以促进AM探针的分散。可用DMSO配置20% Pluronic F-127储存液或其他浓度,只需在正式实验前将其与ENG-2 AM储存液混合,然后加入加载培养基,保证其终浓度<0.1%(w/v)。
1.3 室温或37℃孵育细胞(可能在室温的探针加载质最会高些)、孵育浓度通学为1-10um、孵育时间通常为30-60min、县体的请根据实际情况或参孝文献资料。
1.4【可选】对于大分子量AM探针(分子量大于等于1000g/mol),孵育结束,加入不含AM探针的细胞加载培养基额外孵育20-60min,以确保细胞将AM基团完全去酯化。
1.5 用不含血清和探针的培养基清洗细胞至少一次,以降低细胞外背景荧光。
1.6 最后用合适的仪器来检测荧光信号。最大激发波长525nm,最大发射波长545nm。
【注意】:
(1)如果细胞加载培养基是以碳酸氢钠为缓冲体系,那么加载需要含5% CO2的环境内进行,以防止因CO2损失引起的培养基碱化。
(2)如果细胞加载培养基含血清,那需适当提高AM探针工作浓度,以补偿因AM探针与血清蛋白结合引起的损失。
(3)某些情况下,对分子量接近或超过1000的AM探针,需用不含AM探针的细胞加载缓冲液进一步孵育20-60min,以保证细胞内酯酶能充分降解AM基团。
(4)探针的加载时间和浓度因县体的细胞类型而有差异,请根据县体的细胞类型来优化。
(5)对每一种探针有必要通过校准(calibration)来得到实际解离常数(Kd)。物理条件如温度,pH,离子强度或溶液粘度,以及探针与细胞组成成分如蛋白质的相互作用,都会影响Kd值。实际情况细胞内的Kd比体外溶液通常要高。因此,细胞水平研究有必要进行校准确认实际Kd值。
(6)对于ENG-2,虽然最大激发波长在525nm,但其极强的荧光亮度使其能够用标准的488nm滤片来激发,与Fluo系列的可见光钙离子指示探针检测手段一致。值得注意的是,488nm激发下得到的荧光强度约为最大激发波长下的40%。 -
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产品参数1
- Catalog #: Y-TZ-0013
- Name: Enhanced NaTrium Green-2 AM钠离子指示探针
- CAS: N/A
- Formula: C53H60CI2N2018
- MW: 1084
- Purity: 95%
- Availability: In Stock
- Ships within: 24 hours
- Storage condition: -20°C
- Shipping: Ambient temperature
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