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详细介绍
AF350 Transferrin,Alexa Fluor350 Transferrin
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中文名:AF350标记转铁蛋白
所属分类:
- 产品描述
- 参数
- 价格
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- 商品名称: AF350 Transferrin,Alexa Fluor350 Transferrin
- CAS号: N/A
- 产品货号: Y-R-4722
英文名:AF350 Transferrin,Alexa Fluor350 Transferrin,Transferrin,Alexa Fluor 350 labeled,Transferrin-AF350<br>中文名:AF350标记转铁蛋白<br>
转铁蛋白的分子结构与铁转运功能
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蛋白质家族与来源
转铁蛋白属于铁结合糖蛋白家族,同一家族还包括乳铁蛋白(Lactoferrin)和黑素转铁蛋白(Melanotransferrin)。实验中最常用的为血清转铁蛋白(Serotransferrin),可从人、牛、大鼠等血清中纯化获得,也可通过重组表达制备。 -
结构域与铁结合位点
转铁蛋白多肽链折叠形成两个同源结构域——N端结构域和C端结构域,每个结构域含一个高亲和力的铁离子结合位点。每个结合位点由两个酪氨酸残基、一个天冬氨酸残基、一个组氨酸残基以及一个碳酸根(作为协同阴离子)共同构成。在生理pH(7.4)条件下,每个转铁蛋白分子可结合两个Fe³⁺离子,结合常数约为10²² M⁻¹。 -
脱铁与铁饱和形式的构象差异
未结合铁的脱铁转铁蛋白(apo-transferrin)呈较为开放的构象。结合铁后,转铁蛋白转变为闭合构象,这一变构过程是其被转铁蛋白受体识别所必需的。因此,使用荧光标记转铁蛋白进行受体结合实验前,需将转铁蛋白预先加载铁离子(铁饱和处理),否则脱铁形式与受体的亲和力降低约两个数量级。商品化的AF350标记转铁蛋白通常以铁饱和形式提供,使用时应注意产品说明书标注。 -
转铁蛋白受体结合位点
转铁蛋白与转铁蛋白受体1(TfR1)相互作用的结构基础已被解析。结合界面主要位于转铁蛋白C端结构域的一段螺旋区域以及N端结构域的若干残基。单点突变(如K206E、R207E)可显著降低受体结合能力。在实验中,若需阻断受体介导的内吞,可使用过量未标记转铁蛋白或抗TfR1抗体进行处理。 -
体内分布与半衰期
在体外培养体系中,转铁蛋白通过内吞-循环途径可完整往复利用数十次而不被降解。在体内血清环境中,转铁蛋白的半衰期约为7–10天(小鼠模型)。但在细胞培养基中添加血清时,胎牛血清自身含高浓度牛转铁蛋白(约1–5 mg/mL),若进行竞争性内吞实验,应考虑使用无血清培养基或去除转铁蛋白的血清。 -
物种交叉反应性
人转铁蛋白与大鼠、小鼠的转铁蛋白受体具有较高的交叉结合能力(约60%–80%相对亲和力),而牛转铁蛋白与啮齿类受体的亲和力较低。因此,在人类细胞系(如HeLa、A549)中推荐使用人源转铁蛋白标记物;在大鼠或小鼠原代细胞中,优先选择同源物种来源的转铁蛋白,或提前验证交叉结合效率。
关键词:- (S
- R
- S)-AHPC-PEG6-acid
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产品参数1
- Catalog #: Y-R-4722
- Name: AF350 Transferrin
- CAS: N/A
- Formula: N/A
- MW: N/A
- Purity: 95%
- Availability: In Stock
- Ships within: 24 hours
- Storage condition: -20°C
- Shipping: Ambient temperature
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